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饲料中免疫球蛋白IgG的测定液相色谱法

发布时间: 2013-10-16  点击次数: 2675次

本标准规定了用液相色谱仪测定饲料中免疫球蛋白IgG含量的方法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、含IgG的饲料原料(包括血浆等)中免疫球蛋白IgG的测定。zui低检出限为5μg(取样1g,zui低检出浓度为5mg/kg)。

原理:饲料中免疫球蛋白IgG的测定液相色谱法是根据亲和色谱的原理,在磷酸盐缓冲盐条件下免疫球蛋白IgG与配基相连,在PH2.5的盐酸甘氨酸条件下洗脱免疫球蛋白IgG。
试剂:
磷酸二氢钾 ,磷酸氢二钾, IgG标准液,流动相A(PH6.5,0.05mol/l磷酸盐缓冲液),流动相B(PH2.5,0.05mol/l甘氨酸盐酸缓冲液),
仪器:
液相色谱仪(具紫外检测器和梯度洗脱装置). 色谱工作站, 进样阀,实验室常用仪器设备,PH计 ,匀浆机 ,超纯水装置。
色谱条件:
色谱柱:Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1ml
波长:280nm
进样量:20ul
流动相:流动相A=PH6.5 0.05mol/l磷酸盐缓冲液 流动相B=PH2.5 0.05mol/min甘氨酸盐缓冲液
        时间          流速ml/min   流动相A%     流动相B%
        0-4.5           0.5              100          0
        4.5-15.0      0.5              0            100
        15.0-26.0    0.5             100          0

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